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羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒實驗規則

日期:2025-11-07瀏覽:209次

羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒實驗規則:

1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業人員進行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。

4、實驗時,要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。

6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

9、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。

10、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。為確保實驗數據的可靠性,操作人員需嚴格遵守以下補充細則:

11. 反應板孵育過程中需保持環境溫度恒定(20-25℃),避免因溫度波動影響酶促反應效率。建議使用帶有溫度校準功能的恒溫孵育箱,每小時記錄環境溫度數據。

12. 終止液加入后應立即進行讀數操作,最長間隔時間不得超過10分鐘。延遲檢測可能導致顯色底物過度反應,造成OD值漂移。若使用多通道酶標儀,建議提前預熱儀器并進行光路校準。

13. 標準品稀釋應采用"梯度稀釋法",每個濃度更換無菌EP管。嚴禁使用同一支槍頭連續稀釋不同濃度標準品,避免交叉污染導致的濃度梯度失效。

14. 對于臨界值樣本(Ct值在35-38區間),需進行重復檢測并建立復核機制。建議采用"三線對照"原則:每批次實驗必須包含陽性對照、陰性對照和空白對照,其OD值應符合試劑盒說明書給定的參考范圍。

15. 實驗廢棄物處理須符合生物安全規范:所有接觸過樣本的槍頭、EP管需經121℃高壓滅菌30分鐘后再丟棄;酶標板等塑料制品應浸泡于0.5%次氯酸鈉溶液消毒。

16. 數據記錄應采用雙人核對制,原始數據需包含以下要素:實驗日期、操作者簽名、儀器編號、試劑批號、環境溫濕度、異?,F象記錄等。建議同步保存電子版和紙質版記錄。

17. 定期進行室間質評:每月用標準質控品進行盲樣檢測,將結果錄入LIS系統進行趨勢分析。當CV值>15%時,應立即暫停檢測并排查移液系統、溫控設備或試劑儲存條件。


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